白腐菌Phanerochaete sordida YK 624產(chǎn)錳過(guò)氧化物酶的生產(chǎn)及初步純化
謝慧芳,近藤隆一郎,李忠正
摘要:利用白腐菌Phanerochaete sordida YK624(ATCC 90872),采用Kirk液體培養(yǎng)基在富氧條件下進(jìn)行振動(dòng)培養(yǎng),可得到錳過(guò)氧化物酶(MnP)活性較高和漆酶活性微量的酶液。該酶液通過(guò)超濾、透析、二乙氨基乙基瓊脂糖凝膠(DEAEsepharose CL6B,pharmacia)離子交換柱層析的方法進(jìn)行初步純化后,得到比活性很高(1941.54IU/mg)的MnP酶液。漆酶活性和MnP活性比值的變化、SDSPAGE凝膠電泳試驗(yàn)和406nm附近的吸光值變化均表明,經(jīng)離子交換柱層析后的YK1部分是主要的MnP,電泳試驗(yàn)同時(shí)表明純化后的主要MnP的分子質(zhì)量約為43kDa。經(jīng)超濾、透析、離子交換柱層析純化后得到的酶液YK1可用于進(jìn)一步地研究及應(yīng)用。
關(guān)鍵詞:錳過(guò)氧化物酶;液體培養(yǎng);離子交換柱層析
中圖分類號(hào):Q554.6; TS743.14
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
文章編號(hào):0253-2417(2003)04-0022-05
作者簡(jiǎn)介:謝慧芳(南京林業(yè)大學(xué)化工學(xué)院;江蘇南京 210037)
近藤隆一郎(九州大學(xué)農(nóng)學(xué)部;日本九州福岡81281)
李忠正(南京林業(yè)大學(xué)化工學(xué)院;江蘇南京 210037)