苗長林1，羅文1，呂鵬梅1*，李惠文1，楊玲梅1，袁振宏1，蔣劍春2

（1. 中國科學(xué)院 廣州能源研究所，中國科學(xué)院可再生能源與天然氣水合物重點實驗室，廣東 廣州 510640；2. 中國林業(yè)科學(xué)研究院 林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所，江蘇 南京 210042）

　　摘 要：采用微波-亞硝基胍誘變方法對粗酶活為 10 U/mL 的米黑根毛霉進行誘變處理以獲得高產(chǎn)酶能力的菌株，實驗獲得最佳誘變條件為：功率 500 W 微波處理時間為 100 s，亞硝基胍處理時間為 45 min。通過熒光圈初篩和搖瓶復(fù)篩，篩選出一株酶活可達 20.50 U/mL 突變菌株，該菌株比原始出發(fā)菌株脂肪酶活力提高了 105%，將MN4連續(xù)傳代5次，酶活穩(wěn)定。對MN4突變菌株的產(chǎn)酶條件進行研究，結(jié)果表明，MN4突變菌株最適產(chǎn)酶條件為：發(fā)酵溫度 30℃，起始pH值為7.0，發(fā)酵時間 4 d。在此條件下，該突變菌株所產(chǎn)脂肪酶活最高，達 22.90 U/mL，產(chǎn)酶活力相對原始出發(fā)菌株提高了 129.0%。試驗結(jié)果表明：微波、亞硝基胍對米黑根毛霉菌體細胞的致死作用表現(xiàn)出相似的趨勢，在一定范圍內(nèi)都與誘變時間呈線性正相關(guān)。微波-亞硝基胍復(fù)合處理還呈現(xiàn)一定的協(xié)同效應(yīng)，可以減弱單一誘變劑反復(fù)誘變產(chǎn)生的誘變抗性和飽和性，能夠?qū)崿F(xiàn)優(yōu)勢互補，提高誘變效率。

　　關(guān)鍵詞：脂肪酶；微波；亞硝基胍；誘變；米黑根毛霉

　　中圖分類號：TQ35；Q55 文獻標識碼：A 文章編號：0253-2417（2013）05-0030-05