江小華,朱均均,余世袁,勇強*
(南京林業(yè)大學 化學工程學院,江蘇 南京 210037)
摘 要:通過硫酸銨沉淀、超濾脫鹽、離子交換層析、凝膠過濾層析等手段,從里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C-30木聚糖酶粗酶液中分離純化得到分子質量110.8 ku、比活力為61.99 IU/mg的電泳純β-木糖苷酶。酶學性質研究結果表明:該酶反應以溫度60 ℃、pH值3.5為宜,在60 ℃以下、pH值3.0~8.0酶活性穩(wěn)定,且該酶作用于對硝基苯基-β-D-木糖苷的Km值和Vmax值分別為0.29 μmol/mL和169.99 IU/mg。酶水解機理研究結果表明,該酶從低聚木糖的非還原性末端切斷β-1,4-糖苷鍵釋放出木糖,其最適作用底物是短鏈的低聚木糖,隨著低聚木糖碳鏈的增長,酶作用效率逐漸下降,而對木聚糖幾乎不降解。
關鍵詞:里氏木霉;β-木糖苷酶;分離純化;酶水解
中圖分類號:TQ35 文獻標識碼:A 文章編號:1673-5854(2013)01-0027-06