苗長(zhǎng)林1，羅文1，呂鵬梅1*，李惠文1，楊玲梅1，袁振宏1，蔣劍春2

（1. 中國(guó)科學(xué)院 廣州能源研究所，中國(guó)科學(xué)院可再生能源與天然氣水合物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510640；2. 中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院 林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所，江蘇 南京 210042）

　　摘 要：采用微波-亞硝基胍誘變方法對(duì)粗酶活為 10 U/mL 的米黑根毛霉進(jìn)行誘變處理以獲得高產(chǎn)酶能力的菌株，實(shí)驗(yàn)獲得最佳誘變條件為：功率 500 W 微波處理時(shí)間為 100 s，亞硝基胍處理時(shí)間為 45 min。通過熒光圈初篩和搖瓶復(fù)篩，篩選出一株酶活可達(dá) 20.50 U/mL 突變菌株，該菌株比原始出發(fā)菌株脂肪酶活力提高了 105%，將MN4連續(xù)傳代5次，酶活穩(wěn)定。對(duì)MN4突變菌株的產(chǎn)酶條件進(jìn)行研究，結(jié)果表明，MN4突變菌株最適產(chǎn)酶條件為：發(fā)酵溫度 30℃，起始pH值為7.0，發(fā)酵時(shí)間 4 d。在此條件下，該突變菌株所產(chǎn)脂肪酶活最高，達(dá) 22.90 U/mL，產(chǎn)酶活力相對(duì)原始出發(fā)菌株提高了 129.0%。試驗(yàn)結(jié)果表明：微波、亞硝基胍對(duì)米黑根毛霉菌體細(xì)胞的致死作用表現(xiàn)出相似的趨勢(shì)，在一定范圍內(nèi)都與誘變時(shí)間呈線性正相關(guān)。微波-亞硝基胍復(fù)合處理還呈現(xiàn)一定的協(xié)同效應(yīng)，可以減弱單一誘變劑反復(fù)誘變產(chǎn)生的誘變抗性和飽和性，能夠?qū)崿F(xiàn)優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，提高誘變效率。

　　關(guān)鍵詞：脂肪酶；微波；亞硝基胍；誘變；米黑根毛霉

　　中圖分類號(hào)：TQ35；Q55 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0253-2417（2013）05-0030-05