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里氏木霉β-木糖苷酶的分離純化、酶學(xué)性質(zhì)及水解機(jī)理研究

華訊松香網(wǎng)
2013-03-07
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   江小華,朱均均,余世袁,勇強(qiáng)*

  (南京林業(yè)大學(xué) 化學(xué)工程學(xué)院,江蘇 南京 210037)

  摘 要:通過硫酸銨沉淀、超濾脫鹽、離子交換層析、凝膠過濾層析等手段,從里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C-30木聚糖酶粗酶液中分離純化得到分子質(zhì)量110.8 ku、比活力為61.99 IU/mg的電泳純β-木糖苷酶。酶學(xué)性質(zhì)研究結(jié)果表明:該酶反應(yīng)以溫度60 ℃、pH值3.5為宜,在60 ℃以下、pH值3.0~8.0酶活性穩(wěn)定,且該酶作用于對(duì)硝基苯基-β-D-木糖苷的Km值和Vmax值分別為0.29 μmol/mL和169.99 IU/mg。酶水解機(jī)理研究結(jié)果表明,該酶從低聚木糖的非還原性末端切斷β-1,4-糖苷鍵釋放出木糖,其最適作用底物是短鏈的低聚木糖,隨著低聚木糖碳鏈的增長(zhǎng),酶作用效率逐漸下降,而對(duì)木聚糖幾乎不降解。

  關(guān)鍵詞:里氏木霉;β-木糖苷酶;分離純化;酶水解

  中圖分類號(hào):TQ35 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1673-5854(2013)01-0027-06


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