王劍鋒，徐 瓊，肖志強(qiáng)，余奇峰，錢皇輝，熊飛飛
（東華理工大學(xué)　生物系，江西撫州344000）

　　摘　要：利用單因素、正交試驗(yàn)考察了黑曲霉L菌株發(fā)酵豆渣產(chǎn)β-葡萄糖苷酶的條件和酶解京尼平苷的特性。結(jié)果表明：2 %豆渣適宜作為實(shí)驗(yàn)菌株液體發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基，當(dāng)培養(yǎng)基中接種孢子濃度大于每毫升2×105個時，菌株產(chǎn)酶受發(fā)酵溫度、裝液量的影響顯著，而不受接種量、搖床轉(zhuǎn)速的影響，培養(yǎng)基初始pH值1.5時，菌株仍能正常產(chǎn)酶；優(yōu)化的產(chǎn)酶培養(yǎng)基組成為豆渣1%、米糠1% 和Tween80 0.1%，初始pH值5.5；菌株在發(fā)酵溫度28℃、裝液量50mL（250mL搖瓶）、搖床轉(zhuǎn)速150r/min 的發(fā)酵條件下發(fā)酵120h，發(fā)酵液酶活為（200±10）U/mL。所產(chǎn)β-葡萄糖苷酶水解京尼平苷的最適溫度為55℃、最適pH值2.5、最佳水解時間15min；在該條件下酶的表觀米氏常數(shù)（Km）為1.35g/L，最大水解速率（Vmax）為26.45g/(L•min•mg)，酶活半衰期為15min，50℃時大于60min；酶的水解活性受Na+、Ca2+的顯著激活，受Mg2+、Ba2+、Cu2+、Fe2+、Hg+、Zn2+、Mn2+等離子（10mmol/L）和葡萄糖、乙醇的抑制。

　　關(guān)鍵詞：β-葡萄糖苷酶；豆渣；對硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷；京尼平；黑曲霉

　　中圖分類號：TQ351

　　文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

　　文章編號：0253-2417（2011）01-0035-06